Вплив ацетилхоліну і атропіну на регенераційну неврому сідничного нерва у щурів Грабової а.н.

Регенераційна
неврома, що формується в умовах
впливу великих доз АХ (розведення
вихідного розчину 1/100 і 1/1000),
візуально виявляється потовщеною і
рясно інфільтрованої
макрофагами та поліморфноядерними
лейкоцит. У ній кілька
зростає, в порівнянні з
контролем, зміст
нейролемоцитів і фібробластів, а
також збільшується її
васкуляризація. Кровоносний
мікросудини часто розширені і
переповнені кров’ю. Щільність
розташування регенеруючих
нервових волокон в невромі в
умовах дії АХ кілька
зменшується, причому тільки
відносно невелика їх частина
орієнтована уздовж осі нерва.

Введення
великих доз АТ в область травми (розведення
1/100-1/1000 вихідного розчину)
призводить до зменшення розмірів
регенераційної невроми. В ній
знижується вираженість
запальної інфільтрації, а
також вміст клітин
фібробластичного ряду і
нейролемоцитів. Кровоносний
мікросудин в регенераті
виявляється дещо менше,
ніж у контролі. Вони мають невеликий
діаметр і більш виражену
поздовжню орієнтацію.
Новоутворені нервові волокна
виявляють велику, в порівнянні з
контролем, тропність до
периферичному відрізку нерва і
відносно велика їх частина
орієнтована уздовж його осі.

Морфометрія
також показала, що АХ збільшує,
а АТ зменшує вміст
фібробластів і нейролемоцитів в
регенераційної невромі (Див.табл. 1).
Питома ж довжина регенеруючих
нервових волокон змінюється в
зворотному порядку, тобто АТ
збільшує, А АХ зменшує
значення цього показника. Ступінь
відхилення кількісних
значень всіх вивчених
показників від контрольних
зменшується в міру зниження
концентрації діючих речовин,
а графіки залежності “доза –
ефект ” наближаються до S-подібної (логістичної)
кривий.

Для оцінки
реакцій регенераційної невроми на
АХ і АТ на різних етапах
репаративного процесу
використовували розведення вихідних
розчинів цих речовин 1/1000, що
найближче до верхньої частини
відрізка лінійної залежності
графіків “доза-ефект”.

Через 3 дні
після невротомії в контролях на
кінцях центральних відрізків
пересічених нервів поряд з
клітинами запальної
інфільтрації виявляється
невелика кількість фібробластів
і клітин периферичної глії.
Нервові волокна центрального
відрізка нерва поблизу його кінця
потовщені, мають нерівні контури і
нерівномірно імпрегнуються.
Знаходяться тут нейролеммоцити
збільшені в розмірах, а їх
цитоплазма виглядає більш світлою,
ніж в ділянках нерва, віддалених від
місце пошкодження. На початку
формуватися невромі
виявляються помірне
кількість клітинних елементів і
поодинокі тонкостінні
мікросудини, діаметр яких
варіює в значних межах.
На цьому етапі експерименту лише
зрідка можна спостерігати
регенерацію нервових волокон і їх
вихід за межі центрального
відрізка пошкодженого нерва.

В цей час в
умовах впливу АХ на
пошкоджений нерв спостерігається
більш значне, ніж у контролі,
розширення предсуществующих
кровоносних судин центрального,
особливо периферичного відрізка
нерва, переповнення їх кров’ю і
тромбоз деяких з них. Відзначається посилення, в порівнянні з
контролем, явищ набряку, діапедезу
еритроцитів, а також
запальної інфільтрації
тканин в області травми. Низхідний
дегенерація при впливі АХ
виявляється більш вираженою, ніж в
контролі, що призводить до виразної
фрагментації осьових циліндрів. Формується регенераційна
неврома між відрізками
пересіченого нерва має
відносно великий обсяг,
містить більше фібробластів і
значна кількість
лейкоцитів і макрофагів. В
регенерате збільшується
кількість кровоносних судин,
які зазвичай мають великий
діаметр. Ознаки регенерації
осьових циліндрів в цих умовах
практично відсутні.

У щурів, в
область травми нерва яким
вводили АТ, клітинна і судинна
реакції, а також явища висхідної
дегенерації виражені слабкіше, ніж в
контроль. Виявляються лише
поодинокі короткі гілочки
регенеруючих осьових циліндрів,
проникаючі в неврому. Кількість
кровоносних судин в ній
виявляється меншим, ніж у контролі,
зазвичай вони більш вузькі, і в них
рідко спостерігається крайове стояння
лейкоцит.

Через 7 діб
після початку експерименту в
невромі у тварин контрольних
груп в центральному відрізку нерва
зменшуються, в порівнянні з
попереднім терміном спостереження,
явища роздратування нервових
провідників, а в периферичному
відрізку вони вже поділяються на
фрагменти різної довжини. До цього
часу в регенераті збільшується
кількість кровоносних
мікросудин, зростає
зміст фібробластів і
нейролемоцитів, зменшується
запальна інфільтрація і
з’являються в невеликій кількості
тонкі колагенові волокна. В
невромі вже виявляється безліч
регенеруючих нервових волокон,
значна частина яких не
має виразною орієнтації уздовж
осі нерва.

У тварин,
яким в область травми вводили АХ,
спостерігаються більш виражені, по
порівнянні з контролем, явища
низхідній дегенерації, осьові
циліндри виявляються розділеними
на дрібні фрагменти. У центральному
відрізку нерва спостерігається
деяке посилення, в порівнянні, з
контролем вираженості явищ
роздратування нервових провідників. В
це час між кінцями
пересіченого нерва визначається
потовщена регенераційна
неврома, в якій є
безліч лейкоцитів і макрофагів. Разом з тим відзначається збільшення
у регенераті кількості
фібробластів і нейролемоцитів, а
також кровоносних мікросудин. Останні, як правило, розширені і
переповнені кров’ю, а їх ендотелій
виглядає набряклим. . В умовах
впливу АХ візуально
відзначається деяке зменшення
щільності регенеруючих нервових
провідників в невромі, які,
крім того, мають менше
впорядковане, порівняно з
контролем, розташування.

Регенераційна
неврома, що зазнала дії АТ,
через 7 діб після початку досвіду
містить менше, порівняно з
контролем, кровоносних судин і
клітин із запальною
інфільтрація. Новоутворення і
проникнення в неврому нервових
волокон в цих умовах відбуваються
у більшому обсязі, і нерідко вони
досягають периферичного відрізка
нерв.

Через 28 днів
після невротомії у тварин всіх
груп регенераційні невроми
складаються з сполучної тканини і
містять велику кількість
нервових волокон, основна частина
яких зазвичай проникає в
периферичний відрізок нерва. Вплив АХ на неврому на цьому
етапі експерименту призводить до
збільшення вмісту в ній
кількості кровоносних судин. Вони
поздовжня орієнтація в
новоутвореній ділянці нерва
менш виражена, ніж у контролі, і
органоспецифічні судинні
сплетення чітко не розрізняються. При
цьому мікросудини часто розширені,
переповнені кров’ю, а біля їх
ендотелію порівняно часто
розташовуються лейкоцити. Це
супроводжується збільшенням, по
порівнянні з контролем, змісту в
невромі макрофагів,
поліморфноядерних лейкоцитів,
фібробластів і нейролемоцитів. Щільність розташування нервових
волокон в регенераті незначно
поступається тій, що спостерігається в
контроль. Відносно часто
зустрічаються нервові провідники,
розташовані без певної
орієнтація. У периферичному
відрізку перерізаного нерва в
умовах впливу АХ
значно частіше, ніж у тварин
контрольної групи, виявляються
спіралі Піррончіто.

В
регенератах у щурів, яким вводили
АТ, виявляють менше, ніж в
контролі, клітинних елементів, а
цілком диференційовані
кровоносні мікросудини формують
вже добре помітні ЕПІ -, Пері-і
ендоневральні мережі. У цих
тварин відзначається також
деяке збільшення щільності
розташування новоутворених
нервових волокон.

Морфометрична
оцінка показує, що при
вплив холінотропних речовин
на неврому найбільше
відносне відхилення, по
порівнянні з контролем, змісту в
ній фібробластів відзначається на 3-і –
7-у добу після невротомії, а потім
цей показник швидко знижується (табл. 2). Відносна ж зміна
кількості нейролеммоцитів в цих
умовах поступово плавно
знижується в динаміці експерименту. Різна ступінь зміни змісту
фібробластів і нейролемоцитів в
регенераті у відповідь на вплив
досліджуваних речовин призводить до
зміни їх співвідношення (Див.табл. 2). До 3-ї доби після початку
експерименту АТ достовірно
збільшує відносне
зміст в регенераті
фібробластів, А до 28-ї доби АХ
достовірно збільшує
відносний зміст
нейролемоцитів. Відносний
зміна питомої довжини
регенеруючих нервових волокон
невроми при впливі АХ
поступово знижується в ході досвіду. У відповідь же на вплив АТ
відбувається суттєве
збільшення відносного
відхилення цього показника з
подальшим швидким його зниженням.

Така
чином, проведені дослідження
показали, що холінотропні
препарати можуть істотно
змінювати стан формується
регенераційної невроми. АТ
зменшує, А АХ збільшує
зміст в регенератах
фібробластів і нейролемоцитів. Крім того, АХ через 3 доби і АТ через
28 діб після невротомії змінюють
співвідношення клітинних елементів в
складі сполучнотканинного
регенерат. АТ збільшує, А АХ
зменшує питому довжину
регенеруючих нервових
волокон в
неврома. Отримані графіки
залежності “доза-ефект” мають
вид S-образних (логістичних)
кривих і дозволяють припускати
специфічність виявлених реакцій,
що узгоджується з даними,
отриманими на інших
експериментальних моделях [4, 5, 13, 14]. Оскільки блокатори рецепторів до
нейротрансмітерів не мають
природних аналогів в організмі [8],
реакції невроми на АТ дозволяють
підтвердити “від противного”
специфічність ролі
холінореактивних систем і виявити
участь ендогенного АХ в регуляції
процесу посттравматичної
регенерації сідничного нерва. Реакції різних тканинних
компонентів регенераційної
невроми на АХ і АТ носять не тільки
кількісний, але і якісний
характер, а вираженість
відносної реакції залежить від
фази відновного процесу. Враховуючи подобу реакцій
сполучнотканинних і нейральних
компонентів невроми на вплив
АХ і АТ при посттравматичній
репарації шкіри [4, 5] і сідничного
нерва, можна вважати, що вони
є характерними в цілому для
регенеруючих сполучної
тканини і елементів периферичної
нервової системи.

Список
література

1. Автанділов Г. Г. медична морфометрія. – М.,
Медицина, 1990.- 384 с.

2. Бернштейн А. Л. вплив карбахоліну на
регенерацію перерізаного
периферичного нерва / / Зб.наук.
робіт, посвяч. 70-річчя проф. Сеппа
Е. К. – М.: Медгиз, 1948.- С. 63-70.

3. Бродський С. В.,
Сидорова А. Г., Баранов В. Ф. холінестерази як
синхронізатори регенерації
нервів / / Арх. анатомія.- 1993.- Т. 105, N 9-10.-
С.53.

4. Грабової А. Н . Вплив
норадреналіну, ацетилхоліну,
пропранололу та атропіну на
клітинний склад грануляційної
тканини / / Вісн. морфології.- 1996.- T. 2, N
1.- C. 65-68.

5.Грабовий О.М.
Реакції нервового апарату
раневих регенератів шкіри на дію
нейротрансміттерів //Укр. наук.-мед.
молодіж. журн.- 1997.- N 1-2.- С. 9-12.

6. Грабовий А. Н. імпрегнація сріблом елементів
периферичного відділу нервової
системи в матеріалі залитому в
парафін / / Укр. журн. мед.техніки і
технології.- 1997.- N 3-4.- С. 34-36.

7.Грабовий О.М., Проша
М.В. Ізопропанол-целоїдин-парафіновий
метод заливки матеріалу для
гістологічних досліджень. – Там
же.- 1994.- N 1-2.- С. 44-47.

8. Денисенко п. п. Роль холінореактивних систем в
регуляторних процесах.- М.:
Медицина, 1980.- 296 с.

9. Лазарєва К. П. Про
участю ацетилхоліну і
адреналіну в механізмі зміни
функціональна властивість
регенеруючих товстих м’якотних
нервових волокон у жаби / / Патофізіологія
інфекційних процесів і
алергії: Тр. Саратов. мед. Ін-ту.-
Т. 61/78.- Вип. 3.- Саратов, 1969.- C. 46-49.

10. Фоміна Л. В., Швирьов
А. а. зміна параневрального
русла ішемізованих
стегнового і сідничного нервів
при впливі
ацетилхолінахлориду / / 10-й
Всесоюзний з’їзд анатомів,
гістологів і ембріологів: Тез.
докл.- Полтава, 1986.- С. 362.

11. Челишев А. Ю. фактори підтримки регенерації
периферичних нервів / / успіхи
фізіологічних наук.- 1995.- Т. 26, N 3.-
С. 57-77.

12.Brecknell J.E., Fawcett J.W.
Axonal regeneration //Biol. Rev. Camb. Philos. Soc.- 1996.- V.
71, N 2.- P. 227-255.

13.Kater S.B. Neuronal growth cone
regulation by neurotransmittens //Int. J. Dev. Neurosci.-
1986.- V. 4, Suppl. N 1.- P 38.

14.Saito S., Komiya Y., Igarashi M. Muscarinic
acetylcholine receptors are expressed and enriched in growth
cone membranes isolated from fetal and neonatal rat forebrain.
Pharmacological demonstration and characterization//Neuroscience.-
1991.- V. 45, N 3.- C. 735-745.

15.Schreurs J., Seelig T., Schulman H.
b2-Adrenergic receptors on peripheral nerves //J.
Neurochem.- 1986.- V. 46, N 1.- P. 294-296.

Вплив
ацетилхоліну та атропіну
на регенераційну неврому
сідничного нерва у щурів

Грабовий О.М.

Вивчено локальну дію
ацетилхоліну (АХ) та атропіну (АТ) на
питому довжину нервових волокон,
вміст фібробластів та
нейролемоцитів у регенераційній
невромі (РН) сідничного нерва білих
щурів. Дія різних доз АХ (11-13-й день
після травми) на РН призводить до
зменшення питомої довжини
регенеруючих нервових волокон і
збільшення кількості фібробластів
та клітин глії, прискорює процеси
дегенерації. АТ спричиняє
протилежні зміни в РН. Ступінь
відхилення кількісних значень
вивчених показників збільшується в
міру підвищення дози діючих
речовин, а графіки залежності “доза
– ефект” наближаються до S-подібної
кривої. Найбільша зміна кількості
фібробластів в РН при дії АХ та АТ
відзначається на 3-тю – 7-му, а
нейролемоцитів – на 7-му – 14-ту добу
досліду. Максимальна зміна питомої
довжини регенеруючих нервових
волокон відзначається при дії АХ на
7-му, а АТ- на 7-му – 4-ту добу
експерименту.

Influence of acetylcholine
and atropine on regeneration neuroma
of the sciatic nerve at rats

Grabovoy A.N.

Local influences of acetylcholine (AC) and
atropine (AT) on specific length of nervous fibers, number of
fibroblasts and Schwann cells in regeneration neuroma (RN) of a
sciatic nerve were studied upon white rats. Influence of
different dosages on RN (11-13 day after injury) AC results in
reduction of specific length of regenerating nervous fibers; in
the increase of quantity of fibroblasts and Schwann cells;
accelerates processes of descending and ascending degeneration.
AT – cause opposite changes in RN. The degree of deviations of
quantitative meanings of investigated parameters increased in
accordance with increase of a dosage of working substances, and
the diagrams of dependence “dosage-effect” come nearer to S-like
shape. The greatest change of fibroblasts at influence of AC and
AT is observed by 3-7 days of experiment, and Schwann cells – by
7-14 days. The maximum change of specific length of regenerating
nervous fibers is observed at influence of AC by 7, and AT by 7-14
days of experiment.